برگ های گزنه کیلویی، نپال جمع آوری شد. نمونههای جمعآوریشده با دقت دوباره به آزمایشگاه برای آنالیز شیمیایی منتقل شدند.
برگ های گزنه تمیز شد تا ذرات خارجی آن از بین برود. برگها به مدت 1 دقیقه در دمای 80 درجه سانتیگراد در شرایط مرطوب بلانچ شدند. سپس برگ ها را زهکشی کرده، روی سینی ها قرار دادند تا آب اضافی آن گرفته شود.
سپس سینی ها را داخل خشک کن کابینتی قرار دادند تا در دمای 60 درجه سانتی گراد به مدت 2 روز خشک شوند تا بافت ترد آن مشاهده شود. برگ های خشک شده در آسیاب قهوه آسیاب شده و از طریق مش 80 الک شده و به پودر گزنه تبدیل شده است.
آرد جو و گندم از بازار محلی خریداری می شد. تمام آردهای خشک شده از نظر رطوبت مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند و به ظرف در بسته منتقل شدند.
هر سه نمونه آرد یعنی گندم، جو و گزنه بلافاصله در سه تکرار مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند میزان رطوبت با خشک کردن آون در دمای 100 درجه سانتی گراد تا رسیدن به وزن ثابت اندازه گیری شد.
کل نفت خام هر سه نمونه با استفاده از هگزان در استخراج شد ارزش کل خاکستر با سوزاندن نمونه های آرد به مدت یک شب در دمای 550 درجه سانتی گراد در حداقل 6 ساعت به دست آمد.
محتوای کلسیم با رسوب به صورت اگزالات کلسیم، حل شدن در اسید سولفوریک غلیظ و تیتراسیون با پرمنگنات پتاسیم استاندارد اندازه گیری شد آهن با تبدیل آهن موجود در غذاها به فرم آهن و پس از آن تیمار با تیوسیانات پتاسیم برای تشکیل تیوسیانات آهن قرمز تعیین شد که با رنگ سنجی در 480 نانومتر اندازه گیری می شود.
محتوای کربوهیدرات کل به روش تفاضلی اندازه گیری شد. تمام آنالیزهای شیمیایی با روش هایی که توسط توصیه شده است انجام شد.
تعدادی از خواص عملکردی نمونه های فوق نیز مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. فعالیت آنتی اکسیدانی با روش توصیف شده توسط تعیین شد پلی فنول کل و کاروتنوئیدها طبق روش توصیف شده توسط تعیین شدند. تانن به عنوان یک عامل ضد تغذیه با توجه به AOAC تعیین شد.